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IEC系列的分離條件

更新時(shí)間:2023-09-26      點(diǎn)擊次數(shù):1341
  常用流動(dòng)相可以使用下述緩沖溶液或者氯化鈉、*、硫酸鉀等鹽溶液。而且也可以在緩沖溶液中添加鹽。總鹽濃度一般為20 mM ~ 1 M。
 
  乙二醇和2-丙醇等極性有機(jī)溶劑,可以上限為20 % (v/v)。
 
  梯度洗脫時(shí)請(qǐng)按下述順序進(jìn)行色譜柱的平衡。
 
  緩沖液A(低離子強(qiáng)度)通夜10 mL。
 
  緩沖液B(高離子強(qiáng)度)通夜40 mL置換成正確的反離子。
 
  緩沖液A通夜15 mL平衡。
IEC QA-825、DEAE-825作為流動(dòng)相使用的緩沖溶液,必須和緩沖離子具有相同的正電荷,且在使用的pH條件下有足夠的緩沖能力。
pH range Buffer
4.8 - 5.0 N-Methylpiperazin·HCl
5.0 - 6.0 Piperazine·HCl
5.5 - 7.3 Bis-Tris*1·HCl
6.4 - 7.3 Bis-Tris Propane*2·HCl
7.3 - 7.7 Triethanolamine·HCl
7.5 - 8.0 Tris·HCl
8.0 - 8.5 N-Methyldiethanolamine·HCl
8.4 - 8.8 Diethanolamine·HCl
8.5 - 9.0 1,3-Diaminopropane·HCl
9.0 - 9.5 Ethanolamine·HCl
*1 2-bis(2-hydroxyethyl amino-2-(hyroxymethyl)-13-propanediol)
*2 1,3-bis(tris(hydroxymethyl)methylamino)propane
IEC SP-825、CM-825作為緩沖液使用的流動(dòng)相,必須和緩沖離子擁有相同的正電荷,且在使用時(shí)的pH條件下有足夠的緩沖能力。
pH range Buffer
3.8 - 4.3 Sodium Formate
4.3 - 4.8 Sodium Succinate
4.8 - 5.2 Sodium Acetate
5.0 - 6.0 Sodium Malonate
5.5 - 7.0 2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid (MES)
6.7 - 7.6 Sodium Phosphate
6.8 - 8.2 2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]-ethanesulfonic acid (HEPES)
7.7 - 9.1 N,N-Bis(2-hydroxyethyl) glycine (BICINE)
8.6 - 10.0 2-(cyclohexylamino)ethanesulfonic acid (CHES)

 

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